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   日期:2024-03-17     作者:格维恩    浏览:28    评论:0    
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大肠实验步骤(—)培养基1、普通乳糖蛋白胨培养液亚硫酸钠培养基(供平板分离用)蛋白胨 10g, 乳糖 10g,K2HPO4 3.5g,琼脂 15~20g,蒸馏水1000mL,无水亚硫酸钠 5g,5%的碱性品红乙醇溶液 20mL,pH 7.2~7.4。4、培养基(EMB培养基)(供发酵法平板分离用,3和4可任选一种)蛋白胨10g,乳糖10g,K2HPO4 2.0g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,2%伊红(曙红)水溶液 20mL,5%美蓝(亚甲蓝)水溶液13mL,pH 7.2~7.4。(二)灭菌移液管、灭菌稀释水、试管、杜汉氏小管、革兰氏染色液、灭菌培养皿。(一)水样的采集供细菌学检验的水样,必须按一般无菌操作的基本要求采集,并保证再运送、贮存过程中不受污染。水样从采集到检验不应超过4h ,在0~4℃下保存不应超过24h ,如不能在4h 内分析,应在检验报告上注明保存时间和条件。1、自来水取样:应在水打开放水5min ,再用无菌容器接取水样,待分析。如水样内含有余氯,则采样瓶灭菌后按每500mL水样加3%Na2S2O3.5H2O溶液1mL。2、江、河、湖、池自然水体取样:可用采样器,采样瓶应先灭菌。采样后,瓶内应留有空隙。如果与其他化验项目联合取样,细菌学分析水样应采在其他样品之前。

水质大肠菌群酶底物法检测系统:由LK-2010国产程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、用水等。初发酵试验1、水样稀释:制备水样10-1、10-2的稀释液,方法为用无菌移液管吸取水样10mL放于盛有90mL无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中,充分振荡使混合均匀,并使其中的细菌尽量呈单个存在,即为10-1稀释液;再从10-1制备10-2稀释液。以此类推,稀释到所需倍数。2、接种和培养:以无菌操作于5支三倍浓缩培养基(接种前一定应先检查杜汉氏小管内有无气泡)中各加入水样10mL,5支普通培养基试管中加入水样1mL,5支普通培养基试管中加入10-1稀释液1mL, 小心混匀放入37℃培养箱中培养24h 。此即5管法。3、结果观察:37℃中培养24h后取出观察,观察有无气体(杜汉氏小管内有无气体)和酸产生(培养基有无变色)。在48h之间,培养管内倒置的杜汉氏小管内有任何量的气体积累,或培养基颜色从紫色变为黄色,便可初步断定为阳性反应。

现代社会开展的水质净化工作,其首要步骤便是混凝处理,只有在进行过这一步骤之后,方可开展后续的下沉、滤化等水质净化工作。但是,从当前水质净化工作的实际情况来看,部分地下水的综合质量还有待进一步提升,这就需要在开展水质净化工作时,采用较为特殊且更具科学化的技术。为此,相关部门要不断提升水质净化技术,并加强对水源的管理与控制工作,进而达到良好的净化水资源的效果。

多管发酵法是根据大肠菌群能发酵乳糖产酸产气的特征,检测水样中大肠菌群的方法。多管发酵的大肠菌群阳性,如果在44.5℃的培养基上进行24h的培养,能释放出荧光产物而使培养基在紫外光源的照射下呈现荧光反应,此种方法即可检测出样本中是否含有大肠,具体步骤:取一定量水样于乳糖蛋白胨培养液中进行初发酵实验(推测实验),再进行平板分离(证实实验)复负发酵实验鉴定(完成实验)。

根据各稀释度发酵的管数查可能数(mostprobablenumber,MPN)表,求得每10mL或每升水样中的大肠菌群数。该法方法简单,实验的要求和成本低,但是该方法易受其他因素的干扰而影响结果的准确性。

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