酶标仪的自检标准
1.外观酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。
2.酶标仪的稳定性(漂移)选用492nm波长,在吸光度0.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测定值之差不应超过±0.005A。
3.吸光度测定的准确度选用405,492和620 nm波长,以空气为参比,分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测定3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。
酶标仪使用时的注意事项
1、电源检查。通电前检查电源线是否完整无缺,然后将自动酶标仪外接于交流电源(220V±33V,50Hz±1Hz)上,打开仪器后面的源开关,检查电源指示灯是否亮。若发现自动酶标仪有烟雾、异味或奇怪的声音发出,立即关闭电源,并与经销商联系。
2、自检。打开电源开关,等待约10s,系统进入初始化流程,要完成以下工作:①系统程序加载;②读取用户数据;③等待光源稳定(需等待2~3min);④光路、机械自检(期间滤光片轮会转动,酶标板往返走板一次)。若系统检测正常,屏幕会显示主界面的6种主要功能模块,包括系统管理、项目设置、样本检测、患者信息、数据查询、综合报告。使用者可以根据需要进行具体功能操作。若初始化过程中有错误发生,系统会弹出窗口报告错误信息,应进行检查。
6、触摸屏校准。自动酶标仪经过一段时期使用之后,触摸屏可能会出现偏移现象,这就需要定期检查,通过触摸屏校准功能键做微量调整。
7、清洁。为了使自动酶标仪保持一个良好的工作状态,必须做好日常的清洁工作。
酶标仪的分类
光吸收酶标仪:是用来进行可见光与紫外光吸光度的检测,特定波长的光通过微孔板中的样品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系,由此可以用来定性和定量的检测,光吸收的检测技术成熟,成本低,操作简单,但是动态范围窄,灵敏度比较低,特异性不强,一般可见光和紫外光分别采用钨灯作为光源,而紫外/可见酶标仪是可以将两种光源进行切换,适应不同测量波长的需求。
荧光酶标仪:是用来进行荧光的检测,通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上后,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器,荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例,荧光检测灵敏度高,可实时检测,使用方便,检测模式多样,但是容易受外界干扰,激发光与发射光容易互相影响,干扰检测。
如何使用酶标仪测吸光度
1.将实验待测样品分装到多孔板上。96孔板推荐每孔100ul -200ul体积,384孔板推荐每孔50ul-80ul体积为宜。如因实验需要,同一块多孔板上不同孔的样品体积无法保持一致,需选用带光程矫正功能的酶标仪,将光程矫正到统一的数值,例如Molecular Devices品牌的酶标仪。
2.打开仪器 的微孔板舱门,将多孔板放置入仪器内并关上舱门。
3.打开仪器软件,在实验参数设置界面选择ABS功能。根据实验目的可选择不同的检测模式(Reader Type),包括终点法(Endpoint)、动力学法(Kinetic)、孔域扫描(Well Scan)和光谱扫描(Spectrum)。
4.设置波长,版型,然后读板,得到数据。